Ang labing prone sa mga kapakyasan ug solusyon sa HPLC

Ingon nga usa ka high-precision nga instrumento, ang HPLC dali nga motultol sa pipila ka masamok nga gagmay nga mga problema kung dili kini magamit sa husto nga paagi sa paggamit.Usa sa labing kasagaran nga mga problema mao ang problema sa kompresiyon sa kolum.Giunsa ang dali nga pag-troubleshoot sa usa ka sayup nga chromatograph.Ang sistema sa HPLC nag-una nga naglangkob sa usa ka botelya nga reservoir, usa ka bomba, usa ka injector, usa ka kolum, usa ka lawak sa temperatura sa kolum, usa ka detector ug usa ka sistema sa pagproseso sa datos.Alang sa tibuuk nga sistema, ang mga haligi, bomba ug mga detektor mao ang panguna nga sangkap ug ang panguna nga mga lokasyon nga dali nga adunay mga problema.

Ang yawe sa presyur sa kolum mao ang lugar nga nanginahanglan pag-ayo nga atensyon kung gigamit ang HPLC.Ang kalig-on sa presyur sa kolum suod nga may kalabotan sa chromatographic peak nga porma, kolum nga kahusayan, pagbulag nga kahusayan ug oras sa pagpadayon.Ang kalig-on sa presyur sa kolum wala magpasabot nga ang bili sa presyur lig-on sa usa ka lig-on nga bili, apan hinoon nga ang pressure fluctuation range anaa sa taliwala sa 345kPa o 50PSI (nagtugot sa paggamit sa gradient elution kung ang pressure sa kolum lig-on ug hinayhinay nga nag-usab).Ang sobra ka taas o ubos kaayo nga presyur usa ka problema sa presyur sa kolum.

Ang labing prone sa mga kapakyasan ug solusyon sa HPLC

1, ang taas nga presyur mao ang labing kasagarang problema sa paggamit sa HPLC.Kini nagpasabot sa kalit nga pagtaas sa pressure.Sa kinatibuk-an, adunay mga mosunod nga mga hinungdan: (1) Sa kinatibuk-an, kini tungod sa pagbara sa agianan sa agianan.Niini nga punto, kinahanglan natong susihon kini nga tipik.a.Una, putla ang pagsulod sa vacuum pump.Niini nga punto, ang PEEK tube napuno sa likido aron ang PEEK tube mas gamay kaysa sa solvent nga botelya aron makita kung ang likido nagtulo sa gusto.Kung ang likido wala magtulo o hinay nga pagtulo, ang ulo sa filter sa solvent gibabagan.Pagtambal: Ihumol sa 30% nitric acid sulod sa tunga sa oras ug hugasan sa ultrapure nga tubig.Kung ang likido nagtulo nga random, ang solvent filter head normal ug gisusi;b.Ablihi ang Purge valve aron ang mobile phase dili moagi sa kolum, ug kung ang presyur dili kaayo pagkunhod, ang filter nga puti nga ulo gibabagan.Pagtambal: Ang mga sinala nga whiteheads gikuha ug gi-sonicated sa 10% isopropanol sulod sa tunga sa oras.Sa paghunahuna nga ang presyur mikunhod ubos sa 100PSI, ang sinala nga puti nga ulo normal ug gisusi;c.Kuhaa ang exit end sa kolum, kung ang presyur dili mokunhod, ang kolum gibabagan.Pagtambal: Kung kini usa ka buffer salt blockage, hugasi ang 95% hangtod normal ang presyur.Kung ang pagbabag tungod sa pipila nga labi ka gipreserbar nga materyal, ang usa ka mas kusog nga agos kaysa sa karon nga mobile phase kinahanglan gamiton aron magdali padulong sa normal nga presyur.Kung ang dugay nga presyur sa pagpanglimpyo dili mokunhod sumala sa pamaagi sa ibabaw, ang pagsulod ug outlet sa kolum mahimong isipon nga konektado sa instrumento sa sukwahi, ug ang kolum mahimong limpyohan gamit ang mobile phase.Niini nga panahon, kung ang presyur sa kolum wala gihapon makunhuran, ang kolum nga entrance sieve plate mapulihan lamang, apan sa higayon nga ang operasyon dili maayo, kini sayon ​​​​nga mosangpot sa pagkunhod sa epekto sa kolum, busa sulayi nga gamiton ang dili kaayo.Alang sa malisud nga mga problema, ang pag-ilis sa kolum mahimong ikonsiderar.

(2) Sayop nga setting sa flow rate: Ang husto nga flow rate mahimong i-reset.

(3) Sayop nga ratio sa dagan: ang viscosity index sa lain-laing mga proporsyon sa mga agos lahi, ug ang katugbang nga sistema nga pressure sa dagan nga adunay mas taas nga viscosity mas dako usab.Kung mahimo, ang ubos nga viscosity solvents mahimong ilisan o i-set ug i-andam.

(4) System pressure zero drift: i-adjust ang zero sa liquid level sensor.

2, ang presyur ubos kaayo (1) kasagaran tungod sa pagtulo sa sistema.Unsa ang buhaton: Pangitaa ang matag koneksyon, labi na ang interface sa duha ka tumoy sa kolum, ug higpitan ang lugar nga adunay leak.Kuhaa ang poste ug hugti o linya ang PTFE nga pelikula sa angay nga puwersa.

(2) Ang gas mosulod sa bomba, apan ang presyur kasagaran dili lig-on niining panahona, taas ug ubos.Mas seryoso, ang bomba dili makasuhop sa pluwido.Pamaagi sa pagtambal: ablihi ang balbula sa paglimpyo ug limpyo sa usa ka dagan nga rate sa 3 ~ 5ml / min.Kung dili, ang mga bula sa hangin giaspirar sa balbula sa tambutso gamit ang usa ka gipahinungod nga tubo sa dagom.

(3) Walay mobile phase outflow: susiha kon adunay mobile phase sa reservoir bottle, kon ang lababo naunlod sa mobile phase, ug kung ang bomba nagdagan.

(4) Ang reference valve dili sirado: ang reference valve sirado human sa deceleration.Kasagaran kini moubos sa 0.1.~ 0.2mL/min human sa pagsira sa reference balbula.

Katingbanan:

Niini nga papel, kasagarang mga problema lamang sa liquid chromatography ang gianalisa.Siyempre, sa atong praktikal nga aplikasyon, kita makasugat ug mas daghang ubang mga problema.Sa pagdumala sa sayop, kinahanglan natong sundon ang mosunod nga mga prinsipyo: usba lamang ang usa ka butang matag higayon aron matino ang relasyon tali sa hypothetical factor ug sa problema;Kasagaran, kung mag-ilis sa mga piyesa alang sa pag-troubleshoot, kinahanglan naton hatagan pagtagad ang pagbutang sa mga nabungkag nga wala’y sulod nga mga bahin sa lugar aron malikayan ang basura;Ang pagporma sa usa ka maayong pamatasan sa pagrekord mao ang yawe sa kalampusan sa pagdumala sa sayup.Sa konklusyon, kung gamiton ang HPLC, hinungdanon nga hatagan pagtagad ang sample pretreatment ug husto nga operasyon ug pagmentinar sa kagamitan.