Kinatibuk-ang Pagpahayag sa Protina

ang proteinexpression nagtumong sa teknolohiya sa pag-usab sa target nga gene ngadto sa usa ka artipisyal nga vector ug dayon pagpaila niini ngadto sa recipient cell o cell-free system aron ipahayag ang protina sa heterologous system.

Ang ekspresyon sa protina makasulbad sa problema nga lisud makuha ang lumad nga mga protina. Sukad sa una nga pagtukod sa heterologous nga ekspresyon sa protina sa 1970s, liboan ka mga recombinant nga protina ang malampuson nga gipahayag, nga epektibo nga nagpasiugda sa padayon nga pag-uswag sa biotechnology ug biomedical nga panukiduki ug industriya.

Tumong:

Pinaagi sa pagpahayag sa protina, posible una nga makakuha og mga protina nga lisud makuha gikan sa natural nga mga gigikanan.

Ikaduha, ang dako nga batch ug taas nga kaputli sa mga produkto sa ekspresyon sa protina dili lamang mapadali ang pag-analisar sa target nga protina, apan usab makunhuran ang gasto.

Labaw sa tanan, ang mga recombinant nga protina kasagarang gipili aron ipakita ang taas nga biosafety sa host cell, sa ingon malikayan ang pipila ka potensyal nga biosafety nga risgo sa pathogenic host.

Pamaagi:

Nag-una kini nga naglakip sa mga proseso sa pagkopya sa mga tipik sa gene, pagpaila sa sistema sa ekspresyon, naaghat nga ekspresyon, pagputli sa produkto ug pagtuki.

Kinatibuk-ang Pagpahayag sa Protina

Klasipikasyon:

Ang mga sistema sa ekspresyon sa protina kasagarang bahinon sa:

1. Sistema sa ekspresyon sa nukleyar: Ang Escherichia coli mao ang labing komon nga sistema sa ekspresyon sa protina, nga adunay mga bentaha sa tin-aw nga genetic nga background, sayon ​​​​nga pagpanganak, ubos nga gasto ug taas nga ekspresyon. Bisan pa, kini kulang sa mekanismo sa pagbag-o sa paghubad ug dili angay alang sa glycosylation o espesyal nga cleavage sa pagpili aron mabag-o ang ekspresyon sa protina. Ang Bacillus subtilis mahimo usab nga gamiton alang sa pagpahayag sa protina, ug ang mga bentaha niini mao ang kusog nga abilidad sa pagpahayag sa metaboliko ug ubos nga kalihokan sa protease, nga anam-anam nga nakadani sa atensyon.

2. Sistema sa ekspresyon sa eukaryotic: ang usa ka lebel sa glycosylation mahimong makab-ot human sa paghubad, nga mas duol sa natural nga kalihokan sa mga eukaryotic nga protina. Kini nag-una nga gilakip. ① Ang yeast expression system (komon nga red yeast, brewing yeast, ug uban pa), yeast mahimong high-density mellow, mahimong usbon pagkahuman sa paghubad, adunay mga bentaha sa prokaryotic ug eukaryotic host cells, ug maayo usab nga sistema sa ekspresyon sa protina. ② Sistema sa ekspresyon sa selula sa insekto: ang mga exogenous nga mga gene gibalhin ngadto sa mga selula sa insekto pinaagi sa baculovirus vector aron mapahayag. Kini usa ka taas nga sistema sa pagpahayag alang sa mga eukaryotic nga protina, nga angay alang sa mga protina sa lamad, macromolecular nga protina, protina kinases ug uban pang mga protina nga lisud ipahayag sa prokaryotic system. ③ Sistema sa ekspresyon sa selula sa mammalian: ang kahusayan sa paghubad ug dekorasyon sa mga selula sa mammalian mas taas kaysa sa mga sistema sa selula sa lebadura ug insekto. Ang istruktura ug gimbuhaton sa mga selula sa mammalian mas duol sa lumad nga eukaryotic nga mga protina, apan ang lebel sa ekspresyon ubos ug taas ang gasto.

3. Cell-free nga sistema sa ekspresyon: ang target nga mga protina mahimong ipahayag direkta gikan sa mga partikulo ug PCR nga mga produkto, ug ang sistema sa ekspresyon mao ang cell-free extracts gikan sa Escherichia coli, trigo embryo, rabbit reticulocytes, ug uban pa.