Pipila ka mga pangutana ug tubag mahitungod sa solubility sa giusab nga peptides

1. Unsa nga mga hugaw ang anaa sa mga dili-HPLC nga giputli?

A: Modified peptide ug non-modified peptide impurities sa krudo ug desalted modified peptide: sama sa non-full-length modified peptide ug pipila ka hilaw nga materyales sama sa DTT, TFA, etc.

2. Unsang mga hugaw ang giputli sa HPLC?

A: Ang giusab nga peptide nga giputli sa HPLC aduna pa'y daghang mga hugaw, ug ang mga hugaw kasagaran mubo nga mga peptide ug gamay nga TFA.

3. Unsa ka dugay kini angay?

A: ANG synthesis sa giusab nga peptide kinahanglang tagdon ang gitas-on sa giusab nga peptide, bayad, hydrophilicity ug hydrophobicity ug uban pang mga hinungdan. Kon mas taas ang kinatibuk-ang gitas-on, mas ubos ang kaputli ug abot sa krudo nga produkto, ug mas taas ang kalisud sa pagputli ug ang kalagmitan sa kalisud sa synthesis. Bisan pa, wala’y paagi aron mabag-o ang pagkasunod-sunod sa functional domain sa giusab nga peptide, apan aron makompleto ang synthesis sa giusab nga peptide, usahay pipila ra nga mga auxiliary amino acid ang mahimong idugang sa upstream ug downstream sa functional domain aron mapauswag ang solubility ug hydrophobicity sa giusab nga peptide. Kung ang giusab nga peptide mubo ra kaayo, mahimong adunay mga problema sa synthesis. Ang una nga problema mao nga ang gi-synthesize nga nabag-o nga peptide adunay piho nga mga kalisud sa proseso sa pagproseso sa post. Ang giusab nga peptide sulod sa 5 ka peptides kasagaran adunay hydrophobic amino acids, kung dili ang post-processing lisud. Ang gibag-o nga mga peptide nga ubos sa 15 nga mga residu sa amino acid sa kasagaran makuha nga adunay makapatagbaw nga ani ug abot.

Pipila ka mga pangutana ug tubag mahitungod sa solubility sa giusab nga peptides

4. Giunsa paghukom ang solubility sa giusab nga peptide gikan sa han-ay?

(1) Ang giusab nga peptide nga adunay taas nga proporsiyon sa hydrophobic amino acids sama sa Leu,Val,IIe,Met,Phe ug Trp dili dali matunaw sa tubigon nga solusyon o halos dili matunaw. Kini nga amino acid mahimong problema sa pagputli o synthesis.

(2) the proportion of hydrophobic amino acids under normal conditions < The proportion of charged amino acids can reach up to 20%. If the N or C of the modified peptide is short, the increase of polar amino acids can also improve the solubility.

5. Nganong lisud ang pag-synthesize sa Cys,Met, o Trp?

A: Ang gibag-o nga mga peptide nga adunay Cys, Met, o Trp dili ma-synthesize, ug ang mga produkto nga adunay taas nga kaputli lisud makuha. Kini nag-una tungod sa kamatuoran nga kini nga mga grupo dili kaayo lig-on ug prone sa oksihenasyon. Ang paggamit ug pagtipig niining giusab nga mga peptide nanginahanglan ug espesyal nga pag-atiman aron malikayan ang balikbalik nga pag-abli sa tabon.

6, nganong ang pipila ka sintetikong ani o kaputli mahimong ubos kaayo?

A: Adunay daghang kalainan tali sa synthesis sa giusab nga mga peptide ug sa synthesis sa mga primer. Adunay pipila ka mga primer nga dili ma-synthesize, apan adunay kanunay nga giusab nga mga peptide nga dili ma-synthesize. Sama sa Val, Ile, Tyr ug Trp, Leu, Phe, Gln, ug Thr amino acid duol o loop, ang giusab nga mga peptide dili makainat sa dissolved sa proseso sa synthesis, ang synthetic efficiency mas ubos. Ang kaepektibo sa synthesis ug ang kaputli sa produkto ubos kaayo sa mosunod nga mga kaso, sama sa: repeat Pro, Ser-Ser, repeat Asp, upat ka sunod-sunod nga Gly, etc.

7. Giunsa kini pagputli?

A: Ang gibag-o nga mga peptide kasagarang giputli pinaagi sa reverse-phase column (sama sa C8, C18, ug uban pa) sa 214nm. Ang buffer system kasagaran usa ka solusyon nga adunay TFA, pH2.0. Ang BufferA adunay 0.1% TFAinddH2O, ug ang BufferB adunay 1% TFA/ACN/pH2.0. Kini natunaw sa BufferA sa wala pa ang pagputli; Kung ang solusyon dili makatagbaw, dissolve sa BufferB, unya lasaw sa BufferA; Para sa kaayo nga hydrophobic nga gibag-o nga mga peptide, usahay gamay nga FormicAcid o acetic acid ang idugang.