Ang pagsabut sa phosphoric acid peptide

Kini adunay usa ka importante nga papel sa mga proseso sa kinabuhi, phosphorylating Tyrr, Ser, Thr, nga nahimutang sa peptides. Ang phosphorylated amino acid kasagarang gigamit sa paggama sa phosphoric acid peptide, nga gigamit karon sa single phenyl phosphorylated amino acids. Ang HBTU / phosphorylated amino acid sagad nga gigamit sa pagkonektar sa phosphorylated amino acids HOBt / DIEA nga pamaagi, apan ang phosphoric acid peptide nagpili niini nga mga depekto sa pamaagi, ilabi na sa namugna nga mas taas nga peptide peptide o amino acid phosphate, ang pagkonektar sa efficiency mao ang ubos, ubos nga kaputli sa katapusan nga produkto. Alang sa kini nga phosphopeptide, gikonsiderar namon ang usa ka pinili nga pamaagi sa post-phosphorylation. Ang proseso sa henerasyon mao ang pinili nga pagtangtang sa amino acid side-chain protective nga mga grupo nga kinahanglang markahan human sa peptide synthesis. Alang sa Tyr, ang Thr mahimong direktang mag-react gamit ang mga amino acid nga adunay wala’y proteksyon nga mga kadena sa kilid. -Ser (trt), quantitatively gikuha sa 1% TFA / DCM palibot.

Phosphorylation, uban sa double benzene phosphite phosphoramide ug upat ka nitroheno nga namugna ug phosphoramide tetrazolium aktibo intermediates, konektado sa hydroxy, unya sa ilalum sa acid peroxide oxidation phosphoryl formation, bug-os nga reaksyon.

Sa pagkakaron, ang peptide phosphorylated modification method adunay duha ka nag-unang matang:

(1) direkta nga pagpaila sa moderately garantisadong phosphorylated amino acids ngadto sa polypeptide sequence;

(2) human sa resin nga namugna sa peptide sequence, ngadto sa Ser, Tyr, o Thr phosphorylation sa side chain hydroxyl.

1) ang kasarangan nga garantiya sa phosphorylated amino acid nga direkta nga nagpaila sa han-ay sa peptide:

Kana mao, ang mga amino acid nga kinahanglan nga phosphorylated mahimong phosphorylated ug tukma nga maprotektahan daan gamit ang (Thr,Ser o Tyr), ug unya ang phosphorylation mapig-ot ngadto sa punto sa pagpili sa polypeptide index base sa normal nga proseso sa henerasyon sa SPPS. Kini nga pamaagi mao ang sayon ​​sa pag-operate, nahimong nag-unang pamaagi sa peptide negosyo phosphorylated kausaban.

2) human sa resin nga namugna sa peptide sequence, ngadto sa Ser hydroxy phosphorylation, Tyr, o Thr side chains:

Ang dekorasyon sa phosphorylation gamit ang phosphorylation sa usa ka contraction ngadto sa polypeptide nga pamaagi, tungod sa steric hindrance nga namugna sa dagkong mga grupo sa side chain nga dekorasyon, lisud alang sa phosphorylation sa amino acids nga mokunhod uban sa peptide chain. Sa umaabot, ang pagpaila sa mga amino acid mahimong labi ka lisud, labi na sa dekorasyon nga adunay daghang mga site sa phosphorylation, ang henerasyon mahimong labi ka lisud, ang katapusan nga komposisyon sa produkto komplikado, lisud ibulag, ug ang ani labi ka ubos.

Busa, kung daghang mga site sa kadena sa peptide ang phosphorylated, mahimo’g pilion sa usa nga makamugna ang pagkasunod-sunod sa peptide sa resin ug dayon i-phosphorylate kini sa kilid nga kadena nga hydroxyl nga grupo sa Ser, Tyr, o Thr: ang henerasyon niini nag-una nga naglambigit sa pinili nga pagtangtang sa side chain nga proteksiyon nga grupo nga nanginahanglan pag-ila sa mga amino acid pagkahuman sa peptide synthesis. Alang sa Tyr, ang Thr mahimong direkta nga mogamit sa amino acid nga mga kadena sa kilid nga dili gipanalipdan agig tubag.

Side chain protection base 1% TFA/DCM environment mahimong quantitatively tangtangon. Kung gipili kini nga pamaagi, ang usa ka aktibo nga intermediate nga phosphoramidite tetrazolium mahimong mabuhat gamit ang dibenzyl phosphoramidite ug tetrazolium, nga nalambigit sa usa ka grupo nga hydroxyl, ug dayon gi-oxidize aron maporma ang usa ka grupo nga phosphoryl sa palibot nga peroxyacid aron makompleto ang reaksyon.