Pagsunod sa kemikal nga synthesis sa peptides pinaagi sa solid-phase Fmoc, adunay daghang mga pamaagi sa cleavage, ug duha ka sukaranan nga mga tipo ang gipaila karon nga sagad natong gigamit.
1. Strong acid method (TFA)
Ang uga nga resin gibutang sa usa ka shake flask ug usa ka tukma nga gidaghanon sa mga scavenger nga adunay sulod gidugang. (Scavengers) Trifluoroacetic acid cutting reagent (TFA), 10-25ml/g resin, gitakpan ug giuyog-uyog sa temperatura sa lawak nga may rotation. Ang resin gipahubas, gihugasan 2-3 ka beses sa bag-ong TFA, gisagol ang filtrate, ug 8-10 ka beses ang gidaghanon sa ice diethyl ether gihulog. Usahay, ang pipila ka TFA mahimong ma-steamed aron makakuha og krudo nga peptide precipitates. Ang ether mahimong magamit aron madugangan ang kahusayan sa ulan pinaagi sa pagpabugnaw nga gitabangan sa yelo. Sa katapusan, ang precipitated crude peptide nga produkto nakolekta.
Angayan nga resin: Wang resin o Rink Amide resin
2, Weak acid nga pamaagi (TFA o acetic acid dilution)1% TFA:
Ang 1g sa resin nga adunay mga peptide gidugang sa usa ka baso nga shake flask sa dichloromethane nga solusyon nga adunay sulud nga 1% TFA, gitakpan ug giuyog sa 2 min. Ang filtrate gipugos sa nitrogen ngadto sa laing bag-ong methanol shake flask nga adunay 10% pyridine, ug ang pamaagi gisubli 10 ka beses. Ang mga protective peptides nga nahabilin sa resin gihugasan sa tulo ka beses gamit ang 30ml sa DCM ug 30ml sa MeOH. Ang mga salin gisusi ug gilimpyohan sa TLC o HPLC. Ang tanan nga mga filtrate gihiusa ug 5% sa solvent giluto ubos sa pagkunhod sa presyur. Kap-atan ka ml nga tubig ang gidugang ug ang ulan gitabangan sa makapabugnaw nga sagol. Human sa pagsala, ang produkto gihugasan sa tulo ka beses sa limpyo nga tubig, gibutang sa usa ka vacuum drying oven, ug gipauga sa KOH o P2O5.
Ibubo ang acetic acid:
Ang mga peptide nga gibitay sa resin gitambalan sa cutting solution sulod sa 2 ka oras gamit ang AcOH//TFE/DCM (2:2:6), ang resin gisala, ug ang resin gihugasan sa tulo ka beses gamit ang cutting solution. Ang sobra nga acetic acid gikuha pinaagi sa pagdugang sa 15 ka pilo nga n-hexane sa gisagol nga filtrate ug rotary steeping.
Paggamit resin: 2-CTC resin
Oras sa pag-post: 2025-07-01
