Ang pagputli sa protina mao ang proseso sa pagbulag sa mga tipik sa protina sa usa ka piho nga katuyoan gikan sa mga tisyu, mga selula, o mga sagol nga protina. Ang pagputli sa protina kinahanglan dili lamang magpasiugda sa usa ka lig-on nga kaputli sa nahilit nga protina, apan usab magpadayon sa biological nga kalihokan sa protina. Busa, gikinahanglan ang pagdesinyo sa usa o daghan pang kombinasyon nga mga laraw sa pagputli sumala sa lain-laing mga kabtangan sa protina. Ang panguna nga estratehiya alang sa pagputli sa protina mao ang pagpahimulos sa pagkaparehas ug kalainan tali sa lainlaing mga protina. Pinasukad sa pagkaparehas tali sa mga protina, ang materyal nga dili protina mahimong makuha, ug dayon ang target nga protina mahimong mabulag base sa mga kalainan sa protina. Ilabi na sa paspas nga pag-uswag sa teknolohiya sa genetic engineering, bisan kung daghang mga protina ang gipahayag sa genetic recombination, ang lebel sa pagputli sa protina direkta nga may kalabotan sa kaputli ug kalihokan sa protina. Busa, ang pagputli sa protina nagpabilin nga hinungdanon nga hilisgutan sa modernong biotechnology.
Tumong
Sa usa ka bahin, ang pag-inusara ug pagputli sa mga protina labi ka hinungdanon alang sa lawom nga pagtuon sa istruktura ug gimbuhaton sa mga protina, ug sa pikas bahin, ang pagbulag ug pagputli sa mga protina direkta usab nga may kalabotan sa epekto sa aplikasyon sa mga protina. Busa, ang pagputli sa protina adunay hinungdanon nga papel sa panukiduki ug aplikasyon sa biolohikal nga syensya, ug ang pagbulag sa protina ug teknolohiya sa pagputli usa usab ka hinungdanon nga teknolohiya sa industriya sa biolohikal.
Ang dalan
Ang prinsipyo sa pagputli sa protina mao ang pagbulag sa target nga protina nga adunay makatarunganon nga kahusayan, rate, ani, ug kaputli samtang gipadayon ang biolohikal nga kalihokan ug integridad sa kemikal. Ang mga nag-unang lakang naglakip sa pagpili sa mga materyal nga eksperimento, pretreatment, pagkuha sa protina, klasipikasyon sa krudo nga protina, klasipikasyon sa maayong protina ug pag-ila sa protina.
Ang proseso sa pagputli kinahanglang maghatag ug pagtagad sa: 1 aron mamenosan ang epekto sa kalihokan sa protina, sama sa pagpugong sa hilabihan ka taas o ubos kaayo nga pH, taas nga temperatura ug mga epekto sa bug-at nga metal; 2. Paglihok sa ubos nga temperatura; 3. Sulayi nga ipabilin ang nag-unang lebel sa protina nga sulod sa sample.
Klasipikasyon sa
Ang pagputli sa protina mahimong maklasipikar sumala sa matang sa pamaagi sa pagputli:
I. Precipitation nga paagi, lakip na ang asin deposition, sa paggamit sa asin ions sa paglaglag sa solidified layer sa nawong sa protina, pagbutyag sa hydrophobic nga dapit, ug unya deposition sa pagkab-ot sa katuyoan sa preliminary pagputli; Ang organikong deposition, gamit ang mga organikong solvent aron makunhuran ang kalihokan sa tubig, makaguba sa coagulated film sa ibabaw sa protina, nga mosangpot sa pag-ulan sa protina. Ang ulan usa ka malumo nga pamaagi sa pagputli, apan ang kaputli dili taas ug mahimong gamiton isip usa ka nag-unang proseso sa pagputli.
Duha, pamaagi sa dialysis, lakip ang dialysis bag ug ultrafiltration nga pamaagi. Pinaagi sa dialysis ug ultrafiltration, ang gagmay nga mga hugaw sa molekula mahimong mawagtang, ug ang solusyon sa protina mahimo usab nga mapulihan.
3. Ang mga pamaagi sa Chromatographic naglakip sa molecular sieve gel chromatography, ion exchange chromatography, affinity chromatography (metal chelating affinity chromatography, protina A/G chromatography, receptor protein, substrate, ug uban pa), hydrophobic chromatography, reverse chromatography ug high performance liquid chromatography. Aron makab-ot ang mas maayo nga mga resulta, usa ka kombinasyon sa duha ka mga pamaagi sa chromatographic, sama sa affinity chromatography ug ion exchange chromatography, kasagaran gikinahanglan.
Gawas pa sa mga pamaagi sa ibabaw, adunay daghang uban pang mga pamaagi sa pagputli, sama sa densidad sa gradient centrifugation, nga angay alang sa paghimo sa mga protina nga taas ang kaputli, apan nanginahanglan mas taas nga mga kondisyon sa eksperimento. Ang mga kristal nga protina angay alang sa pagtuki sa biological nga istruktura, sama sa X-transmission.
Oras sa pag-post: 2025-07-01